تست LAL (Limulus Amebocyte Lysate) یکی از حساسترین و معتبرترین روشها برای شناسایی و سنجش اندوتوکسینهای باکتریهای گرم منفی است. اندوتوکسینها مولکولهای سمی موجود در دیواره سلولی این باکتریها هستند که در صورت ورود به فرآوردههای دارویی یا تزریقی میتوانند باعث تب، شوک یا واکنشهای التهابی شدید در بدن شوند. به همین دلیل، انجام تست LAL یکی از الزامات کلیدی کنترل کیفی در محصولات استریل و بیولوژیک محسوب میشود.
معرفی روش کروموژنیک End-Point
در روش LAL کروموژنیک به شیوه End-Point، واکنش بین اندوتوکسین و لیزات آمیبوسیت خرچنگ نعلاسبی (Limulus polyphemus) منجر به فعال شدن یک زنجیره آنزیمی میشود. این واکنش، یک کروموژن (مولکول رنگزا) را آزاد میکند که شدت رنگ تولیدی آن متناسب با غلظت اندوتوکسین موجود در نمونه است.
در روش End-Point برخلاف روش Kinetic، اندازهگیری فقط در یک نقطه زمانی نهایی انجام میشود و جذب نوری (Optical Density) نمونهها در طول موج 405 نانومتر قرائت میشود. این روش برای آزمونهای روتین و تأیید کیفیت مواد اولیه دارویی، بهویژه مواد پروتئینی یا پلیساکاریدی، بسیار مناسب است.
آزمون اندوتوکسن کروموژنیک در شرکت آرک زیست آزما
در شرکت آرک زیست آزما، آزمون اندوتوکسین کروموژنیک به روش End-Point مطابق با الزامات فارماکوپه اروپا (Ph. Eur. 2.6.14) و ایالات متحده (USP <85>) انجام میشود. انجام آزمون توسط پرسنل متبحر در شرایط استاندارد و خوانش با استفاده از پلیت ریدر پیشرفته Biotek Synergy HTX و آنالیز نرم افزار Gen5 انجام میشود.
