UPLC یا Ultra-Performance Liquid Chromatography نسل جدیدی از HPLC است. در نسل جدید ذرات در ستون ها کوچکتر و فشرده تر شده اند و تکنولوژی تفکیک از نظر قدرت تفکیک و سرعت تفکیک به نحو خارق العاده ای پیشرفت کرده است.
تکنولوژی UPLC
در سال 2004، علم جداسازی با معرفی کروماتوگرافی مایع با معرفی تکنیک UPLC متحول شد. پیشرفت های قابل توجهی در ابزار دقیق و فن آوری ستون برای دستیابی به افزایش چشمگیر در وضوح، سرعت و حساسیت در کروماتوگرافی مایع انجام شد. برای اولین بار، یک رویکرد جامع شامل نوآوری های همزمان در فن آوری ذرات و طراحی ابزار برای مقابله و غلبه بر چالش های آزمایشگاه تحلیلی تلاش شد. این کار به منظور موفقیت بیشتر دانشمندان تحلیلی و سودآوری و بهره وری بیشتر کسب و کارها انجام شد.
برای بیش از چهار دهه، کاهش اندازه ذرات فاز ثابت برای بهبود کارایی جداسازی کروماتوگرافی مورد استفاده قرار گرفته است. تا همین اواخر، فناوری LC به سطح بالایی رسیده بود که در آن به دلیل تأثیر منفی گسترش نوار ابزار و محدوده فشار محدود، مزایای کاهش اندازه ذرات به طور کامل قابل درک نبود.
در سیستم UPLC ذرات تا اندازه 1.7 – 1.8 میکرومتر در ستون پک شده اند تا بتوانند قدرت تفکیک را افزایش دهند. در این سیستم فاز مایع با فشار 15000 به واحد psi در درون ستون جریان دارد که بیشتر از 2 برابر در سیستم HPLC است.
تکنولوژی HPLC باعث شده است که رزولوشن، حساسیت و سرعت تفکیک در کروماتوگرافی بالا رفته و به همین دلیل در زمان بسیار کم و مقادیر کم نمونه بتوانیم تفکیک بسیار خوبی را انجام دهیم
تفاوت های HPLC و UPLC
UPLC یا UHPLC (کروماتوگرافی مایع با عملکرد فوق العاده بالا) و HPLC هر دو تکنیک های کروماتوگرافی مایع برای جداسازی اجزای یک ترکیب یا مخلوط هستند. جدول زیر برخی از تفاوت های بین این دو تکنیک جداسازی را نشان می دهد.
| SEC-HPLC | SEC-U(H)PLC | |
| ابعاد معمول ستون | 7.8 x 300 mm | 4.6 x 150 mm |
| اندازه ذرات ستون | 3 – 10 µm | < 3 µm |
| زمان معمول انجام یک تست | 45 minutes | 10 minutes |
| میزان محلول مصرف شده در یک تست | 45 mL | 10 mL |
| فشار پمپ | 4 MPa | 70 MPa |
| میزان معمول مصرف نمونه | 300 µg | 20 µg |
| رزولوشن پیک | Good | Best |
| تغییر فاز موبایل | Normal | Fast |
دتکتورهای اختصاصی UPLC
علاوه بر این چندین آشکار ساز جدید در سیستم UPLC استفاده شده که استفاده آنها در HPLC امکان پذیر نبود. یکی از این دتکتورها، light scattering یا آشکارساز پراکنش نور است. همچنین در UPLC میتوانید از دتکتور ویسکومتری viscometry استفاده کنید.
افزودن آشکارسازهای جدید، اطلاعات برتری در مورد پلیمرها و الیگومرها، از جمله وزن مولکولی مطلق، اندازه و ساختار، در مقایسه با اندازهگیریهای تک آشکارساز معمولی ارائه میدهد. قبلاً این دو تکنیک به دلیل تأثیرات گسترش باند (band-broadening) و پراکندگی که هنگام عبور پیکهای باریک از سلولهای آشکارساز اتفاق میافتد، ناسازگار بودند.
